时间: 2024-04-29 06:03:54 | 发布者: 华体会官方网页登录入口
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至会出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液含有了普遍的使用的柠檬酸钠等抗原修复试剂等,pH值约为8.5,可以大大降低漂片破碎的风险并去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可优先考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
本产品很适合用于漂片的免疫染色,也可用于常规的石蜡切片和冰冻切片等其它样品的检测。
。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品能用于100个样品。包装清单:
抗原修复过程能够正常的使用碧云天的染色缸染色架邮寄夹做相关操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
倍,配制成抗原修复液(1X)。本产品仅限于专业技术人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
b. 抗原修复:用重蒸水或Milli-Q水将本抗原修复液(10X)稀释10倍,配制成抗原修复液(1X),例如1ml本抗原修复液(10X)加入9ml重蒸水或Milli-Q水,混合均匀,即得10ml抗原修复液(1X)。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,80℃加热约30分钟。抗原修复液(1X)使用前需预热到80℃,加热能够正常的使用普通的水浴锅。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤
1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。2. 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,80℃加热约30分钟。抗原修复液(1X)使用前需预热到80℃。加热能够正常的使用普通的水浴锅。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用
免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。3. 对于其它样品的抗原修复,可以借鉴石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。